НРЛ Молекулярна микробиология
Завеждащ НРЛ Молекулярна микробиология
Доц. Виктория Левтерова
тел. +359 2 944 69 99 / вътр. 290/353
електронна поща:
Състав на лабораторията:
гл. ас. Надя Бранкова, д.м.
гл. ас. Иван Симеоновски, д.м.
Маги Иванова
биолог
Кристин Танкова
медицински лаборант
Красимира Василева
лабораторен работник
История на лабораторията
Основана е през 1972 г. от проф. С. Тодоров като лаборатория по „Радиационна микробиология” към секция „Молекулярна и клетъчна биология” на института. Дейността й е свързана с изотопен анализ на нуклеинови киселини от микроорганизмен произход; молекулна хибридизация; градиентен анализ и др. От 1992-2000 г. лабораторията е преименувана на лаборатория по „Радиационна микробиология и РНК технологии” и се ръководи от ст.н.с. II ст. д-р В. Златев.
Основни насоки в разработките на колектива са: изследване на серовар специфични плазмиди на салмонелни щамове; плазмиден анализ на епидемични дизентерийни щамове; генетика и метаболизъм на коклюшни бактерии.
От 2000 г. ръководител на Лаборатория „Молекулярна и радиационна микробиология” е доц.С. Панайотов, д.м. Основни направления в дейността на лабораторията са: рутинна диагностика чрез РСR и RT-PCR тест за: коклюш (B.pertussis), атипични пневмонии, придобити в обществото, причинени от C.pneumoniae, M.pneumoniae, хламидиални инфекции (C.trachomatis), разработване на молекулярно-епидемиологични методи - случайно амплифициране на полиморфни участъци ДНК (RAPD), амплифициране на специфични полиморфни участъци ДНК (AFLP).
От 2012г. се разработи и въведе диагностика на бактериални менингити чрез РСR и RealTime PCR за N.meningitidis, S.pneumoniaе, H. influenzae.
През 2013г и 2014г. се въведе типизиране на N.meningitidis чрез RealTimePCR и типизиране на 16 серотипа/серогрупи S.pneumoniaе чрез РСR.
През 2016г се въведе типизиране на 6 серогрупи H. influenzae чрез RealTimePCR и въведохме диагностика на Bordetella parapertussis чрез PCR.
Изследвания, провеждани в лабораторията
Коклюш (Bordetella pertussis)
Коклюш още пертусис или магарешка кашлица е ваксинопредотвратимо, остро инфекциозно заболяване на дихателните пътища, причинявано от грам-отрицателния кокобактерий Bordetella pertussis.
Инфекцията се предава по въздушно-капков път. Засяга всички възрастови групи, но най-уязвимата група от обществото са кърмачетата под едногодишна възраст, при които е най-голям рискът от тежки усложнения или дори смъртен изход.
Подходящи материали за изследване чрез PCR са назофарингеален и гърлен секрет.
Паракоклюш (Bordetella parapertussis)
Паракоклюшът е силно контагиозно респираторно заболяване, засягащо всички възрастови групи от населението. Причинител е Грам-отрицателният бактерий Bordetella parapertussis, който е родствен на Bordetella рertussis.
При кърмачетата (на възраст под 6 месеца) може да се наблюдава по-тежък ход на парапертусис инфекцията. При тях, както и при пациенти от други възрастови групи, е възможно доказване на коинфекция коклюш с паракоклюш.
Подходящи материали за изследване чрез PCR са назофарингеален и гърлен секрет.
Хламидиални инфекции (Chlamydia trachomatis)
Хламидиалната инфекция се причинява от вътреклетъчен бактерий, наречен Chlamydia trachomatis (Хламидия трахоматис).
Тя се предава по полов път и засяга както мъже, така и жени.
Подходящи материали за изследване чрез PCR за мъже е първа сутрешна урина или уретрален секрет, а за жени – цервикален секрет, взет от гинеколог.
Атипични пневмонии, придобити в обществото
Изследване за атипични пневмонии, придобити в обществото, причинени от Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae
Chlamydophila pneumoniae, Mycoplasma pneumoniae, Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae причиняват атипични пневмонии. Инфекците се предават по въздушно-капков път.
Подходящи материали за изследване чрез PCR са гърлен секрет, храчка или БАЛ (бронхо-алвеоларен лаваж).
Изследване за Helicobacter pylori
Хеликобактер пилори е спирален грам-отрицателен микроорганизъм. Специалистите са установили, че тя съществува в стомаха на около 50% от хората. Голяма част от инфектираните са без симптоми и не подозират проблемите с гастроинтестиналните нарушения - язви, ГЕРБ, стомашен рак.
Подходящ материал за изследване чрез PCR е биопсия.
Изследване за бактериален менингит (Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae)
Множество бактерии причиняват менингити. От тях Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae предизвикват около 80% от случаите. Етиологията зависи от това дали е вследствие на вътреболнична инфекция или е придобит в обществото, като възрастта и общото състояние на пациента са от особено значение. Заразяването става по въздушно-капков път от болни лица или здрави носители на бактериите и при черепни травми.
Класическите симптоми на острия бактериален менингит включват повишена температура, главоболие, обща хиперестезия (светобоязън, непоносимост към силни звуци и допир), менингизъм и нарушения в съзнанието. Менингеалните симптоми се дължат на дразнене на мозъчните обвивки, вследствие на повишеното вътречерепно налягане, което е причинено от мозъчния оток и нарушенията в оттичането на цереброспиналната течност. Подходящ материал за изследване чрез PCR е ликвор.
Ежегодно качеството на диагностичната работа на лабораторията е контролирано и сертифицирано от Интитута по стандартизация и документация на медицинските лаборатории 
- Дюселдорф, Германия.
Дейност на лабораторията
Акредитерана е от Българска служба по акредитация (БСА) от 2003 г. по европейските изисквания на стандарта БДС ISO EN 17025 за високо качество на работата.
От 1998 г. ежегодно качеството на диагностичната работа е контролирано и сертифицирано от Интитута по стандартизация и документация на медицинските лаборатории - Дюселдорф, Германия.
От 2006 г. лабораторията организира Национален външен лабораторен контрол на молекулярно-биологичната диагностика в България с издаване на сертификати.
Организира се ежегодно курс, включен в програмата за СДК по молекулярна диагностика и типизиране на инфекциозните причинители.
Лабораторията редовно публикува резултати от работата си в специализирани международни и български научни списания и докладва на национални и международни конгреси.
План за дейността на Националната Референтна Лаборатория по “Молекулярна микробиология”
ЦЕНИ
| # | Изследван микроорганизъм | Вид анализ | Цена |
|---|---|---|---|
| 1 | Bordetella pertussis (коклюш) | RealTime PCR | 41 лв. |
| 2 | Bordetella parapertussis (паракоклюш) | RealTime PCR | 41 лв. |
| 3 | Chlamydia trachomatis | RealTime PCR | 41 лв. |
| 4 | Helicobacter pylori | PCR | 41 лв. |
| 5 | Chlamydophila pneumoniae | RealTime PCR | 41 лв. |
| 6 | Mycoplasma pneumoniae | RealTime PCR | 41 лв. |
| 7 | Neisseria meningitidis | RealTime PCR | 41 лв. |
| 8 | Haemophilus influenzae | RealTime PCR | 41 лв. |
| 9 | Streptococcus pneumoniae | RealTime PCR | 41 лв. |
| 10 | Neisseria gonorrhoeae | RealTime PCR | 41 лв. |
| 11 | Mycoplasma genitalium | RealTime PCR | 41 лв. |
| 12 | Ureaplasma urealyticum | RealTime PCR | 41 лв. |
| 13 | Mycoplasma hominis | RealTime PCR | 41 лв. |
| 14 | Вземане на гърлен или очен секрет | 4 лв. |
Научни теми
В НРЛ „Молекулярна микробиология” се извършва активна научно-изследователска дейност, като по-значимите научни теми през последните пет години са:
- Проект на ФНИ: Молекулярно-генетична идентификация и създаване на архивна геномна банка на циркулиращите pneumoniae при деца, както и анализ на разпространените серотипове, свързани с въвеждане на пневмококовите ваксини в Р. България.
- Проект: „Фундаментални, транслиращи и клинични изследвания в областта на инфекциите и инфекциозната имунология” по Оперативна Програма „Наука и образование за интелигентен растеж”, НЦЗПБ.
- Проект на ФНИ: „Молекулярно-генетични проучвания върху разпространението на пневмоцистозата при хората в България”.
- Проект на ФНИ: № КП-06-ДК 1/10 29.03. 2021г. „Проучване на взаимодействието на специфични структурни протеини на SARS-CoV-2 с биологично активни молекули и приложението им за създаване на бързи антигени тестове за ранна диагностика на COVID-19“,по „Конкурс за финансиране на фундаментални научни изследвания по обществени предизвикателства, свързани с пандемията от COVID-19 – 2020 г.“
Резултатите от научната дейност на лабораторията през последните пет години са представени в следните публикации в международни и национални реферирани списания:
- Viktoriya Stefanova Levterova , Ivan Marinov Simeonovski, Nadia Boyanova Brankova, Magi Ventsislavova Ivanova, Ivva Ognianova Philipova and Mariya Rumenova Malcheva, “CARRIAGE AND DISTRIBUTION OF SEROTYPES STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE IN HEALTHY VACCINATED CHILDREN FOR THE YEAR 2021 IN BULGARIA”, World Journal of Advanced Research and Reviews , 2022, 14(03), 511–516; https://doi.org/10.30574/wjarr.2022.14.3.0594, IF:7,6
- Виктория Левтерова, Иван Симеоновски, Надя Бранкова, Тодор Кантарджиев. Менингококови менингити – диагностика и серотипизиране чрез молекулярни методи. Мед Инфо, 2020, 3, 76-80
- Надя Бранкова, Виктория Левтерова, Иван Симеоновски, Мария Малчева, Тодор Кантарджиев. Обобщен анализ на разпространението на коклюшната инфекция в България за десетгодишен период (2009 - 2018г.) Педиатрия 2020, бр.3, 26-29 Q4
- Philipova I, Levterova V, Simeonovski I, Kantardjiev T. “Azithromycin treatment failure and macrolide resistance in Mycoplasma genitalium infections in Sofia, Bulgaria”, Folia Med Plovdiv, [in press] Impact factor: 0.378 Q4
- Ivva Philipova,Victoriya Levterova,Ivan Simeonovski,Todor Kantardjiev, High rate of fluoroquinolone resistant Neisseria gonorrhoeaedetected by molecular surveillance of antimicrobial resistance determinants in Bulgaria, Biotechnology & Biotechnological Equipment, Pages 942-948 | Received 04 Jul 2022, Accepted 07 Nov 2022, Published online: 17 Nov 2022, DOI: 1080/13102818.2022.2146532 Impact factor: 1.762
- Ivva Philipova, Viktoryia Levterova,Ivan Simeonovski, Todor Kantardjiev. Antimicrobial Resistance and Whole Genome Sequencing Analysis of Neisseria gonorrhoeae Isolates in Bulgaria, 2019, p.1579.BIOLOGY Microbiology, IF: 0,378
- Philipova I, Levterova V, Simeonovski I, Kantardjiev T. “Azithromycin treatment failure and macrolide resistance in Mycoplasma genitalium infections in Sofia, Bulgaria”, Folia Med Plovdiv, [in press] http://www.proceedings.bas.bg/ddn/IF_Metrics.html. IF:378
- Левтерова, В., И. Симеоновски, Н. Бранкова, И. Филипова, М. Малчева, Т. Веселов Кантарджиев. Носителство и разпространение на серотипове Streptococcus pneumoniae при здрави деца до 6 годишна възраст в България след въвеждане на PCV10 в националния ваксинационен календар, Педиатрия, ТОМ LXII, 3/2022 година Q4
- Victoria Levterova, Ivan Simeonovski, Nadia Brankova, Magi Ivanova, Ivva Philipova, Mariya Malcheva , A CASE REPORT OF a child with recurrENT catarrh CO-COLONIZED with five STREPTOCOCCUS pneumoniae serotypes, PROBLEMS of infectious and parasitic diseases, August 11, 2022,ISSN: 0204-9155 (Print), SSN: 2815-2808 (Online) Q4
- Malcheva, I. Philipova, I. Simeonovski, V. Levterova, N. Brankova, T. Kantardjiev “Antimicrobial susceptibility of S. pneumoniae strains isolated from children with nasopharyngeal carriage”, Problems of Infectious and Parasitic Diseases 48(1):15-20, 2020 Q4
- Philipova, V. Levterova, I. Simeonovski, Z. Ivanova, L Boyanova, T. Kantardjiev “Prevalence of Neisseria gonorrhoeae and Mycoplasma genitalium in Bulgarian population from Sofia municipality of reproductive age, 2018-2019” Problems of Infectious and Parasitic Diseases 49(2):20-26, 2021 Q4
- И. Томова, Р. Ненова, Н. Бранкова, В. Левтерова. Диагностика на Легионерска болест при български пациенти. In Spiro 2020, 55(4), 29-33